Konečně test na priony?  
Vědci pokročili ve vývoji techniky, kterou by se mohlo zjišťovat, kdo z nás je a kdo není nakažen variantní Creutzfeldt-Jakobovou chorobou.

 

 

Nositel Nobelovy ceny Stanley Prusiner. Od doby, kdy objevil priony, se snaží získat metodu, kterou by šlo spongiformní encefalopatie z krve v praxi testovat.

Ta jízlivost v názvu má své opodstatnění. Takové zprávy už jsme totiž na Oslu měli dvě a nic moc z toho nakonec nebylo. Navíc se stále jedná o prakticky stejnou metodu. Jednou tuto zprávu o brzkém zavedení testu oznamoval nositel Nobelovy ceny. Ten se nechal slyšet, že prakticky upotřebitelný test bude mít zhruba do jednoho roku. Neměl. Několikrát si pouštěl pusu na špacír také Claudio Soto. Tento profesor už příslib zavedení praktického testu na priony z krve avizoval do šesti měsíců. Bylo to v roce 2005 a zatím nic. Přitom oba z avizovaných způsobů, stejně jako tento třetí, o kterém se teprve rozepíšeme, jsou založeny na stejném principu.

Zvětšit obrázek
Průvodní jev CJD – hromadění zašmodrchaných prionů,, kterých se buňky neumí zbavit, mozek postupně zahubí.

Na inkubaci infekčních prionů s neinfekčními. Tedy na snaze těmi infekčními priony, kterých je ve vzorku jen pár, infikovat zdravé molekuly prionového proteinu a získat ve zkumavce početnější množství změněných (zašmodrchaných) prionů, které by se už daly dalšími metodami prokázat. 


Zatímco dřívější naděje se upíraly do Ameriky, nynější oznámení o prolomení smůly přichází ze Skotska. Jde o techniku, jež se dosud používala u modelových zvířat a která pracuje na principu urychlování množení prionů.

 

Popis staronového testu
Metoda je známá pod zkratkou PMCA a znamená cyklické množení pozměněných proteinů. Jak už jsme avizovali, je i ona také založena na promíchání testovaného vzorku se zdravými kousky prionového proteinu a z čekání na to, co se bude dít. Je-li totiž v testovaném vzorku infekce, zašmodrchají se i ty zdravé molekuly a ve zkumavce se vytvoří hodně zašmodrchaných prionových “kriplů“.

Claudio A. Soto, Ph.D., profesor neurologie na University of Texas. Prakticky upotřebitelný test se mu nevede a nevede.

Ve skotském Edinburghu nyní vědci poprvé předvedli, že se jim daří nepatrné množství prionů, které odeberou z nemocného lidského mozku, množit. Jako zdroj zdravého prionového proteinu, ze kterého se priony tvořily, posloužil extrakt z normálních lidských krevních destiček. Aby docházelo k co největšímu  kontaktu provázejícímu změněnu zdravých molekul na zašmodrchané a aby se to urychlilo, čarují vědci nad vzorkem ultrazvukem. Ten totiž rozláme shluky prionů na mnoho menších částeček. Celý cyklus inkubace s následným rozbíjením chuchvalců se mnohonásobně opakuje. Celé to trvá desítky hodin. Pokud v původním vzorku bylo přítomno několik infekčních prionů, tak se  tímto procesem namnožily. Udělaly to na úkor normálních prionů, které se k testovanému vzorku dostaly v podobě toho extraktu ze zdravých krevních destiček. 


Metodu je nyní ještě třeba ověřit. Prokázat, že nepracuje jen s hrstkou infekčních prionů izolovaných z mozku nemocného, ale že skutečně dokáže priony stejně dobře množit, i když jako vzorek poslouží třeba krev.

Zvětšit obrázek
Bude  skostký tým profesora Jamese Ironside úspěšnější než byly týmy americké? 

V tom ale bude zádrhel. Nejde ani tak o odběr krve s destičkami a o provedení testu. Zádrhel spočívá v čekání. Dlouhém čekání na to, zda se u testem vyšetřených a pozitivně zjištěných osob prokáže, že se u nich choroba nvCJD také vyskytla. Vzhledem k dlouhé inkubační době choroby se takové prověřování funkčnosti testu může protáhnout na roky.
Profesor James Ironside z University of Edinburgh, který je členem britského Národního centra pro monitorování CJD, tento nový test komentuje s mírnou lítostí. To proto, že jej nebude možno použít jako rychlý test, který by se dělal na počkání před každou transfúzí krve. Vinou je již zmíněná časová doba testu, která se pravděpodobně bude pohybovat okolo 70 hodin. Z toho plyne, že jeho uplatnění bude především jako test vyhledávací. A také jako test, který bude potvrzovat diagnózu. I tak bude podle Ironside tento test velmi potřebný. Ještě jedno dilema ale bude tento test provázet. Souvisí s etickou stránkou věci. Když test u nás chorobu prokáže, platné nám to prakticky nebude. Nedokážeme ji totiž léčit.


Celkem prokázaných osob, které zemřely na novou variantu CJD, od roku 1990, kdy byla poprvé popsána jako nozeologická jednotka, je 161. Jsou mezi nimi i tři lidé, kterým nemoc přenesli sami lékaři prostřednictvím infikované krve od jiného dárce. Samozřejmě, že k přenosu nedošlo vědomě. Přišlo se na to když dárce krve, který nešťastníkům svojí krví vypomohl, umřel. Dárce i příjemce měli nvJCD. Praxe na takový test, který by podobné excesy vyloučil a umožnil testovat na infekční priony živé organismy (ne až po smrti odebráním části mozku), už dlouho čeká.  
 
Pramen: University of Edinburgh


 

Datum: 11.07.2007 04:22
Tisk článku

Související články:

CDI test na priony     Autor: Josef Pazdera (23.10.2002)



Diskuze:

Praktický dopad

Jan Šimůnek,2007-07-11 10:54:17

Pokud budou testy použitelné, budou moci vyloučit v některých případech dárce orgánů.

Odpovědět

A co dál?

Colisa Chuna,2007-07-11 08:17:42

Nechci shazovat práci pánů profesorů, ale pokud budou odebírat vzorky z mozku, tak leda z kadáveru nebo z JUTu. Z hlediska klinické diagnozy jsou současné metody aspoň funkční. Přitom často jsme "šokováni" kde všude se už priony objevili (někde psali že i ve vydělané kůži!?)a s faktorem infekčnost se nedaří pracovat ani s primárně infekční tkání, mozkem. Jeví se mi tedy kardinální otázka co to ten prion vlastně je a jestli náhodou místo infekčního agens není pouze produktem infekčnosti třeba např. opravdového viru, jako např. u vztekliny. A informace z praxe a z ČR, ani v jednom případu BSE nebyl při vyšetřování kohort potvrzen další nemocný kus. Takže otázka infekčnosti není jasná ani klinicky, natož v testech (in vivo a in vitro). A pokud budu protivný, tak není jisté, jestli jsme potenciální nemocné kusy vůbec schopni odhalit ?!?

Odpovědět


hlavně

pavelm,2007-07-11 15:50:50

Hlavně jsem nikdy nepochopil, jak se člověk může priony nakazit jídlem, když se při trávení všechny bílkoviny stejně rozloží.

Odpovědět


to pavelm

Q,2007-07-12 13:57:10

No jenze vsechny bilkoviny se travenim prave nerozlozi, tohle dogma bylo prijimane hooodne dlouhou dobu, ale nakonec se ukazalo, ze se az do strev a dokonce az do krve dostavaji nejenom fragmenty bilkovin, ale i biologicky funkcni proteiny. Predstava (aspon pro me) dost nepredstavitelna, ale je to tak - viz nektere pripravky, ktere na tomhle zakladu funguji (nebo jsou tak inzerovany :-)) myslim ze se to jmenuje wobenzym, a jsou i dalsi.

Odpovědět


to Colisa Chuna

Q,2007-07-12 14:06:35

Zajimava myslenka, ze by byl primarnim zdrojem "spatne" konformace prionu nejaky vir... Pokud ja vim, porad se nevi, jaky je vlastne primarni zdroj, nebo nevite nekdo neco?

Odpovědět


pro Q

Colisa Chuna,2007-07-13 14:48:28

No to jste uhodil hřebíček na hlavičku. Kde a co je primární zdroj? Všeobecně se souhlasí s tím, že by to měla být masokostní moučka ve které je zapracována nervová tkáň (tzv. SRM) nedostatečně tepelně a tlakově upravená (nejprve se jakýkoliv masový odpad mimo kuchyňské zbytky třídí podle rizika nákazy do kategorií a pak zpracovává. Jiné státy než ČR kusy tkáně "fritují" v rozpáleném oleji, v ČR se pracovává v destruktorech za cca 130oC a vysokého tlaku, což je lepší)Ale priony (ne nemoc!) se objevují i přes přibližně už 10 leté vyloučení masokostní moučky z krmiva (spaluje se např. v cementárnách)Klinický případ BSE v ČR se nevvyskytl. Všechny případy jsou jen laboratorně zachycené případy nálezu prionu v míše, při povinném vyšetření skotu po porážce a staršího 30 měsíců. Stačí? V ČR nemáme jediný klinický případ nemoci (jen ty záchyty prionů) a to na jatkách se dnes poráží skot i 120 měsíců starý, kde by snad už nějaká spongiopatie se mohla vyvinout. Celkové počty vyšetřeného skotu jdou už do miliónů. A pokud se priony zachytily, vybilo se stádo, ale že by někdo udělal histologické řezy alespoň u skotu který byl na priony pozitivni, o potvrdil souvislost mezi málezem prionu a spongifirmitou mozku, tak to ne. Tedy nevím o tom a zajímalo by mě to. Takže v kuloárech se proslýchá, že masokostní moučka se možná vrátí za pevně stanovených podmínek (teplota, tlak, surovina) do krmiva. Co pro mě z toho plyne? Pořád málo základního výzkumu a hodně populistického žvanění. A těch tisíců utracených kusů v kohortách podle mě zbytečně, je mi fakt líto.

Odpovědět


Diskuze je otevřená pouze 7dní od zvěřejnění příspěvku nebo na povolení redakce







Zásady ochrany osobních údajů webu osel.cz